El m\u00e9todo enzim\u00e1tico<\/strong> ha sido validado por la Organizaci\u00f3n Internacional de la Vid y el Vino (OIV)<\/strong> como m\u00e9todo de referencia de tipo II, fruto de un estudio en profundidad en el que participaron m\u00e1s de 20 importantes laboratorios y grandes bodegas de Espa\u00f1a, Francia, Italia, Austria, Portugal y Alemania, analizando diferentes muestras con diferentes niveles de concentraci\u00f3n de \u00e1cido ac\u00e9tico en un estudio interlaboratorios. Como resultado se obtuvo que el m\u00e9todo enzim\u00e1tico (dotado de una gran especificidad anal\u00edtica) resulta ser un m\u00e9todo con excelente exactitud y precisi\u00f3n y una incertidumbre reducida<\/strong> (\u00b1 0,03 g\/L) <\/p>\n\n\n\n

Es un m\u00e9todo con excelente repetibilidad, reproducible y con un l\u00edmite de cuantificaci\u00f3n muy bajo. Se puede automatizar con analizadores autom\u00e1ticos<\/strong> para lograrlo con agilidad y precisi\u00f3n en tiempo real y reducir el error derivado del usuario (imposible modificar resultados que est\u00e1n asociados a una l\u00ednea de calibraci\u00f3n de est\u00e1ndares certificados ISO a 5 niveles de concentraci\u00f3n diferentes). <\/p>\n\n\n\n

Entre los distintos kits y marcas para este tipo de an\u00e1lisis, tomamos como referencia el de la empresa multinacional de biotecnolog\u00eda Biosystems<\/strong>, con sede en Barcelona, Espa\u00f1a<\/strong>, que se basa, seg\u00fan los dictados de la OIV, en la actividad de tres enzimas: Acetato Quinasa (AK), Piruvato Quinasa (PK) y Lactato Deshidrogenasa (D-LDH). <\/strong><\/p>\n\n\n\n

El acetato presente en la muestra consume, mediante las reacciones descritas, NADH que puede determinarse por espectrofotometr\u00eda. <\/p>\n\n\n\n

Acetato + ATP –A\u21d2 Acetilfosfato + ADP <\/strong>
ADP + PEP –P\u21d2 ATP + Piruvato<\/strong>
Piruvato + \u03b2-NADH –D-LD\u21d2 Lactato + \u03b2-NAD <\/strong><\/p>\n\n\n\n